德国默克试剂盒即酶联免疫吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。 由于ELISA方法灵敏,特异性强不需要特殊设备,所以被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,德国默克试剂盒而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性)如标本的影响上海劲马为大家解读ELISA检测的影响因素。
溶血标本及混有红细胞的血清采用ELISA法检测易产生假阳性。可能是溶血血清中含有过氧化酶物质(红细胞或血红蛋白中的亚铁血红素),德国默克试剂盒在洗涤过程中往往难以*洗脱,德国默克试剂盒它可使H2O2释放出原生态氧(O),从而催化底物四甲基联苯胺生成可溶性的有色物质,即显蓝色,产生假阳性[。所以严重溶血标本禁用。
标本受细菌污染。因菌体中可能含有内源性辣根过氧化物酶,因此,德国默克试剂盒被细菌污染的标本同溶血标本一样,亦可产生非特异性显色而干扰测定结果,标本保存不当。在冰箱中保存过久的标本,在间接法ELISA测定中会导致本底过深、造成假阳性;为克服上述干扰,德国默克试剂盒测定的血清标本宜为新鲜采集;如不能立即测定,5 d内测定的血清标本可存放于4℃,1周后测定的血清标本应低温冻存;冻存后融解的标本,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混合后再测定,但混匀时应轻柔,不可强烈振荡。
制备德国默克试剂盒的方法步骤:
1、抗原表位的计算机筛选;
2、抗原的制备;
3、血清的采集;
4、间接ELISA方法的建立;
5、间接ELISA方法的敏感性和特异性验证;
6、德国默克试剂盒的稳定性验证;
7、对屠宰场进行临床检测。该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的试剂盒能有效检出感染猪的戊型肝炎病毒,德国默克试剂盒适用于大批量发病样本的检测,可用于猪戊肝的快速诊断,并预防、控制猪戊肝病毒的流行和阻断戊肝病毒由猪向人传播。
塑料试管能吸附抗原物质,德国默克试剂盒样本久置在塑料管内会使样本内抗原含量下降造成假阴性。使用真空采血管;并使用非抗凝标本,肝素抗凝血浆会增加OD值,EDTA、酶抑制剂(如NaN3)可抑制ELISA系统中辣根过氧化物酶活性。标本凝固不全。在工作中,有时为了争取时间快速检测,常在血液还未开始凝固时即强行离心分离血清,使血清中仍残留部分纤维蛋白原,在德国默克试剂盒过程中可以形成肉眼可见的纤维蛋白块,易造成假阳性结果;因此血液标本采集后必须使其充分凝固后再分离血清。